色谱柱的使用和维护方法及使用方法

　　【***** 维修保养】色谱是一种分离分析手段，分离是核心，因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好，分析速度快等。当然，色谱柱的正确使用和维护**重要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。　　1、避免压力和温度的急剧变化及**机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。　　2、应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为**是水，反之亦然，流动相使用前必须经脱气和过滤处理。　　3、一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。　　4、选择使用适宜的流动相(尤其是pH)，以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避免分析柱中的硅胶基质被溶解，压力升高是需要更换预柱的信号。　　5、避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处 理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。　　6、经常用强溶剂冲洗色谱柱，**保留在柱内的杂质。在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50～75ml。　　7、避免使用高粘度的溶剂作为流动相；如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在实验完毕柱子冲洗干净。　　8、进样样品要提纯。　　9、严格控制进样量，不要超载。　　10、每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱，好用洗脱能力强的洗脱液冲洗，例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡。当采用盐缓冲溶液作流动相时，使用完后应用无盐流动相冲洗。含卤族元素(氟、氯、溴)的化合物可能会腐蚀不锈钢管道，不宜长期与之接触。装在HPLC仪上柱子如不经常使用，应每隔4~5天开机冲洗15分钟。　　11、大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2-7.5，尽量不超过该色谱柱的pH范围。　　12、按说明书保存色谱柱，禁止讲缓冲液留在柱内过夜，注意反相柱不能用纯水长时间冲。　　13、不建议拆开柱子，自己更换填料。 色谱柱的正确使用与安装

液相色谱柱都是按照严格的标准生产和测试的，如果能按照正确的方法安装和使用色谱柱，不但能得到更佳的检测结果，更能够延长色谱柱的使用寿命。

先说色谱柱的安装：

1、拆开柱包装盒，确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。

2、拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。

3、按柱管上标示的流动相流向，将色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口相连接(如条件允许，建议在柱前使用保护柱)；柱的出口与检测器连接。

连接管是外径为1.57mm、内径为0.1-0.3mm的不锈钢管。连接管的两端均有空心螺钉及密封用压环。在接管时**要设法降低柱外死体积。

连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到底，然后顺时针拧紧空心螺钉，直到拧不动为止，再用扳手继续顺时针拧1／4-1／2圈，切记不要用力过大。如色谱柱通过流动相加压后有漏液现象，请用扳手继续顺时针拧1／4圈，直至不漏液为止。

注意：

1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积，进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线，同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。

安装色谱柱之前，确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。

2、为了使色谱柱与仪器系统达到良好的连接效果，应尽量使用与色谱柱接口相匹配的螺帽和锥形接头，如原来的接头长期匹配其他类型的色谱柱，建议在连接新色谱柱前应检查匹配情况，避免造成色谱柱的损坏或因色谱柱不匹配造成的漏液。

3、使用PEEK 材料的通用接头，只需用手拧紧不需要特定扳手，使用压力为5000psi；使用温度不得超过100℃。

毛细管色谱柱只有正确的安装，才能保证发挥其***佳的性能和延长使用寿命。所以以上有关此产品的安装使用您了解的怎么样了呢，有相关问题可以访问维库仪器***哦！