液相色谱色谱柱的保养及维修保养

　　【***** 维修保养】液相色谱是一类分离与分析技术，其特点是以液体作为流动相，发展到今天已经成为了包括科学研究、工业生产、环境保护、食品**在内多个领域常用的科研分析仪器之一。与此同时，随着液相色谱的普及，因为仪器故障或者使用不规范导致的事故新闻也时有发生，因此，了解液相色谱相关的规范与使用方法，对于使用者来说尤为重要。今天我们就来聊聊色谱柱的使用。　　色谱柱是色谱仪的心脏，若是使用不规范或者维护不到位，可能会直接影响柱效，缩短使用寿命，甚至造成损坏，因此使用者需要掌握**的使用规范。　　避免压力和温度的急剧变化及**机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况，柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料。因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。　　应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为**是水，反之亦然。　　一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。　　选择使用适宜的流动相(尤其是pH)，以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避免分析柱中的硅胶基质被溶解。　　避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。　　经常用强溶剂冲洗色谱柱，**保留在柱内的杂质。在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50~75ml。　　保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。　　色谱柱使用过程中，如果压力升高，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗；另一种可能是大分子进入柱内，使柱头被污染；如果柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。 液相色谱仪维护应该注意的事项

液相色谱仪根据固定相是液体或是固体，又分为液-液色谱及液-固色谱。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较，具有**、快速、灵敏等特点。 1、 泵。 泵是液相色谱仪的心脏。处于良好工作状态的泵，基线平稳，保留时间重现性好，梯度洗脱时压力变化缓慢而且平稳。 1)选择优质的溶剂和试剂，在进入仪器前用 0.45um 膜过滤，并进行脱气处理。 2)泵开始使用时，**要用合适的流动相**清洗干净。 3)定期检查并更换在线过滤片及有关的垫圈，经常清洗进液处的微孔滤头。 4)改变流动相时，应注意沉淀的产生，以防止泵堵塞。 2、色谱柱。 色谱柱是化合物分离的关键。保养良好的色谱柱具有很高的塔板数，基线平稳。 1)色谱柱比较娇气不能够碰撞、弯曲或强烈震荡;安装时要保证阀件或管路的清洁。 2)流动相在使用前必须进行脱气处理，尽量不使用或少使用高粘度的流动相。 3)在满足灵敏度的前提下，尽可能的使用小进样量。如果样品比较脏，要进行净化或提纯处理。 4)分析结束后要清洗掉进样阀中残留的样品，并用流动相或适当的溶剂清洗色谱柱。 5)如长期不用，用适当的有机溶剂保存并封闭或定期补充合适的流动相。 3 、检测器 分析完成后，马上关闭检测器。 4 、进样器 分析结束后反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染或堵塞。