液相色谱常见符号与术语归纳 液相色谱使用方法

　　【***** 使用手册】在液相色谱的相关运用和了解过程中，难免会出现一些不容易看懂的缩写字符，如果不能了解这些字符所对应的意义和背后的含义，那么便不能更加有效率的使用和学习液相色谱仪的相关知识，下面便是总结的一些在液相色谱仪中常用的符号和术语(以字母顺序排列)：　　ACN 乙腈 Acetonitrile 　　AUFS满量程的吸光度单位Absorbance units, full scale 　　As 峰不对称因子 　　B 二元流动相中的强溶剂；例如：反相HPLC的甲醇/水混合液中的甲醇 　　BSA 牛血清白蛋白(一种蛋白质) Bovine serum albumin 　　CAF 咖啡因(中性溶质) 　　Caffeine CRF 色谱响应因子 Chromatographic response function；色谱图总分离度的定量指标 　　dc 色谱柱内径(cm) 　　DMOA 二甲基辛胺 Dimethyloctylamine 　　DNB 2,4-二硝基甲酰(基) 2，4-Dinitrobenzoyl 　　dp 色谱柱填料的粒度(cm) 　　DRYLAB 液相资源公司(LC Resources INC.)的计算机模拟软件。DRYLAB I用于等度预测，DRYLAB G用于梯度预测 F 流动相的流速(ml/min) 　　FC-113 1，1，2-三氟-1，2，2-三氯乙烷 　　GPC 凝胶渗透色谱法 Gel-permeation chromatography 　　HA 酸性溶质，能电离出A- 　　Hex 己烷 Hexane 　　Hr 二相邻谱带之间的谷高 　　HVA 高香草酸 Homovanillic acid 　　h’ 峰高 　　h1,h2 相邻谱峰1和谱峰2的峰高 　　IEC 离子交换色谱法 Ion-exchange chromatography 　　IP 离子对 Ion-pair 　　IPC 离子对色谱法 Ion-pair chromatography 　　J 色谱峰强度参数 　　K’所给谱峰的容量因子，k’=(tR-t0)/t0=tR’/t0，tR=t0(1+k’) 　　k 梯度洗脱过程中，某溶质的k’的平均值或有效值 　　kw 以水做流动相k’的外推值 　　k1,k2 相邻谱峰1和谱峰2的容量因子 　　L 色谱柱长度(cm) 　　Lc 检测器流动池光路的长度(cm) 　　M 溶质的分子量 　　MC 二氯甲烷 Methylene chloride 　　MDST 混合设计统计技术 Mixture-design statistical technique；一种优化流动相的软件　　MeOH 甲醇 Methanol 　　MTBE 甲基叔丁醚 Methyl-t-butyl ether 　　MW 溶质的分子量 　　N 色谱柱塔板数 　　NAPA N-乙酰普鲁卡因胺 N-Acetylprocainamide(碱性溶质) 　　N0 检测器的基线噪音 　　ODS 十八烷基硅烷 Octadecylsilyl 　　P 色谱柱的压力降[通常以巴(bar)表示，也用psi；另外，也用作柱极性参数　　PA 普鲁卡因胺 Procainamide(碱性物质)　　PAH 聚芳香烃 Polyaromatic Hydrocarbon 　　PESOS 优化流动相的计算机软件(美国Perkin-Elmer产品) 　　pKa 溶质酸性常数的负对数；当pH=pKa时，溶质中有一半是电离的 　　Rk 保留值范围，Rk=(末谱峰k’)/(初谱峰k’) 　　RRM 相对分离度图(通常N=10000)　　Rs 相邻二谱峰的分离度 　　S 当流动相中的%B改变时，测量溶质保留值的变化速率的参数 　　SAL 水杨酸 Salicylic Acid 　　SEC 尺寸排阻色谱法 Size-exclusion chromatography 　　S/N 信噪比 Signal to noise ratio 　　t 分离时间(min)(样品进样时t=0) 　　tp 梯度系统的滞后时间(min) 　　TBA 四丁基铵离子 Tetrabutylammonium ion 　　TEA 三乙胺 Triethylamine 　　THF 四氢呋喃 Tetrahydrofuran 　　tk 在用于校正等度洗脱溶剂强度的流动相离开梯度混合器时，梯度洗脱的时间TLC 薄层色谱法 Thin-layer chromatography 　　TMA 四甲基铵 Tetramethylammonium(盐) 　　TMS 三甲基硅烷 Trimethylsilyl 　　tO 色谱柱的死时间(min) 　　tR 溶质的保留时间(min) 　　tG 梯度时间(min)，即梯度开始至结束的时间 t1,t2 相邻谱峰1和谱峰2的保留时间(min 　　ti 色谱图中峰的保留时间(min) 　　tf 色谱图中末峰的保留时间(min) 　　△tg tf-ti tx (tf-ti)/2 　　UV 紫外光 　　Vm 色谱柱的死体积(mL)，Vm=t0F 　　VMA 香草扁桃酸 Vanillymandelic acid 　　wm 化合物的进样量 　　w1,w2 相邻谱峰1和谱峰2于半峰高处(W1/2)的宽度(min)　　W1,W2 相邻谱峰1和谱峰2的基线宽度(min) 　　W1/2 半峰高处的谱带宽度 　　以上是常见的在液相色谱仪中出现的符号和术语归纳，受限于时间和精力，本文归纳仅为不**汇总，疏漏之处，欢迎补充。 液相色谱流动相说明

　　流动相相当于液相的血液，可以想象对液相的重要程度。那么流动相都需要注意什么呢?　　01、过滤溶剂　　溶剂在使用前**要用0.5μm的过滤器过滤，如果使用固体化学试剂(缓冲盐)配制流动相，过滤特别重要，不能让固体微粒污染泵，阻塞进样器和柱头过滤片。本实验室有水溶性和脂溶性两种过滤膜供选择(反光面朝上)，过滤水溶性流动相时(如甲醇/水)，先用1～2mL甲醇润湿过滤膜，有助于快速抽滤。　　02、保持储液瓶的清洁　　用普通溶剂瓶作流动相储液器应不定期废弃瓶子，***后一次应用HPLC级的水或溶剂清洗，不能在清洗过程中留下污迹。　　03、保证溶剂的质量　　**要用HPLC级的溶剂，水也应达到HPLC级，同样也要使用高纯度的缓冲盐。　　一些因流动相引起的常见问题　　01、流动相脱气不充分　　流动相受热，或者流动相不同组分混合时会有气体产生，气泡进入泵内引起压力波动，增加噪音，色谱图上出现毛刺。可试用下列方法解决问题：流动相再脱气;采用更有效的脱气方法或两种方法配合使用;改系统内混合为系统外预混合。　　02、流动相供给不畅　　流动相用完，管道中吸入气体引起泵压力不稳。应经常观察储液器中流动相的量，加足流动相保证所有的样品分析完毕。输液管道上装沉子沉至瓶底，储液器盖上留一小孔正好夹住进液管，使其不能上下移动。　　过滤器阻塞引起管道和泵腔空化，压力不稳。过滤器被微粒所阻塞或长霉，去掉过滤器后如果系统运转正常，说明已找出问题，换上新的过滤器则可。有时候换上新的过滤器仍然不畅，那就需要查查流动相的制备过程，或者换大孔径的过滤器。不管如何，流动相都需要重新过滤。　　流速过高、阻力大，造成空化现象，这是由于过滤器孔径、管道内径、流速和溶剂黏度等引起的。如果流速大于10mL/min，常会出现这种现象。　　使用下列方法解决：　　(1)使用低流速;　　(2)换大孔径的过滤器;　　(3)增加进液管道内径;　　(4)抬高或加压储液器;　　(5)不用过滤器，但流动相**要先过滤;　　(6)储液器盖子太紧，在储液器内形成真空，打出的流动相不连续。应松开盖子或留有1mm的缝隙;　　(7)进液管道阻塞或弯曲使泵抽不到液，注意调整进液管道或更换新的。其它问题包括渗漏或接头松动、泵部件损坏等，都能引起供液不正常。　　03、流动相和储液器被污染　　由于污染，噪音越来越大，检测器基线上升。污染物可能被泵以稳定的浓度打入系统，而再以稳定的浓度流出来，所以在色谱图中不出多余的峰。用梯度洗脱时弱流动相可以使污染物聚在柱顶，流动相强度增加后污染物可能被洗脱出来一个大的伪峰。有时基线噪音突然增大或突然提高，都是因为反复加进新的流动相或系统用得太久(通宵)所造成的。新加进的流动相有污染物或者流动相长霉，繁殖了**。　　脏的储液器会污染清洁的流动相。每种流动相备有专用的储液器，或者定期报废储液器。　　流动相污染来自这几个方面　　04、试剂质量不高，玻璃器皿不合格;　　微生物的影响;　　配制流动相时操作不当等;　　因此要求高纯度化学试剂和HPLC级溶剂;　　玻璃器皿按规定清洗干净;　　为防止微生物生长，每天要用甲醇清洗系统;　　怀疑系统内生长了微生物，可用稀硝酸冲洗即可(注意不要损坏柱和管道系统);　　真空脱气时防止泵油带入流动相;　　用清洁的惰性塞子、搅棒、过滤器和玻璃器皿配制流动相;　　已经污染的流动相**要废弃掉。