【光度计】光度计三个常见问题

荧光分光光度计与紫外分光光度计属一类产品，结构均由激发光源、单色器、样品室、光电倍 增管和读出（记录）装置所组成。

但是它们光源是不同的，荧光分光光度计多采用高压汞灯、氙灯和?激光光源。

同时，荧光测量多采用激发光和发射光成直角的光路，仪器组件的布置有所不同。

(1)激发光源：要比吸收法中光源强度大。

汞灯：发射强度大、稳定，不需复杂电源，但谱线不连续，数目少，主要用于滤片荧光计。

碘钨灯：提供连续光谱300~700mn。

氙灯：发出射线的强度大，谱线连续，分布于200~700 nm光域内；

且在300~400nm 波段内射线强度几乎相等，但该灯的电源功率要求大，且电源稳定，因此电源结构复杂。

激光：发光强度大，能**地提高荧光分析的灵敏度。

(2)样品池：

通常由石英池（液体样品用）或固体样品架（粉末或片状样品）组成。

测量液体时，光源与检测器成直角安排；

测量固体时，光源与检测器成锐角安排。

低温荧光测定时在一样品池外套一个液氮的透明石英真空瓶。

(3)单色器：

荧光分光计通常具有两个滤光片：**滤光片在光源与样品池之间，滤去不需要的光，让需要的激发光通过。

第二滤光片在样品池与检测器之间，滤去溶剂散射 光、容器表面散射光、杂质发出的光等，让待测物质发射的荧光通过。

荧光分光光度计通常具有两个光栅，位置同滤光片，单色性好。

(4)检测器：

因荧光通常较弱，采用光电倍增管作检测器，灵敏度高。

选择光电倍增管要考虑：响应波长、灵敏度和嗓声水平。

蓝敏管对蛋白质、核酸的测量适用，而红敏管则适用于荧光染料检测。

(5)显示系统：光度表、计算机操作系统等。