应该如何选择紫外可见分光光度计测量条件 光度计使用方法

　　【*** 使用手册】紫外分光光度计是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外可见分光光度计是一种使用频率较高的光谱分析仪器，在使用过程中，争取选择合适的测量条件对于结果的准确性是非常重要的。　　狭缝宽度　　选择原则：仪器的狭缝宽度应小于被测组分吸收带半高度的1/10，以减小狭缝宽度时，被测组分的吸光度不再增大为准。　　狭缝宽度影响测量的灵敏度和标准曲线的线性范围。对于给定仪器，增大狭缝的宽度就是增加入射光的谱带宽度，降低单色光的纯度，在**范围内使测量灵敏度下降，并使标准曲线的线性变差。但狭缝宽度太小的话入射光强太弱，仪器噪声所占比列增大，不利于测量。简单地说就是：　　狭缝宽度大，入射光强度大，单色性差，A与c线性差；　　狭缝宽度小，入射光强度弱，不利于测量。　　吸光度的范围　　**仪器的测量结果都存在**的误差，对于分光光度计而言，由于仪器噪音的影响，仪器测量T值过程中，存在**幅度的偶然误差ΔT，它对测定结果的相对误差的影响可由Lambret-Beer定律导出。由朗伯-比尔定律可知，吸光度A、待测溶液浓度c和透光率T为负对数，因此不同的透光率下，相同的测量误差ΔT引起的吸光度误差和浓度误差是不同的。所以，在紫外-可见分光光度法的测量过程中应选择适宜的吸光度范围以减少测量误差。　　仪器的ΔT=0.5%时，只有透光率T在20%~65%时，即吸光度A在0.2～0.7范围时，浓度的测量相对误差较小(△c/c%<2%)。且透光率T=36.8%，吸光度A=0.434时，可得浓度相对误差的**值。　　对高精度的分光光度计，ΔT可低达0.01%，误差较小的范围可延伸到高吸收度区(A为-0.17～2)。　　参比溶液(空白溶液)　　1.容剂空白：　　在测量波长下，只有被测组分有吸收，其它组分与显色剂无吸收，可以用溶剂如蒸馏水作为空白溶液。　　2.试剂空白：　　在测量波长下，显色剂有吸收，可不加试样溶液而**按照显色反应的相同条件配制空白溶液。　　3.试样空白：　　在测量波长下，其它组分有吸收，显色剂无吸收。　　4.加掩蔽剂或改变实验条件：　　在测量波长下，其它组分与显色剂有吸收。加掩蔽剂或改变实验条件，使组分不与显色剂作用，配制溶液作空白。 原子吸收分光光度计的结构说明 　　原子吸收分光光度计分为单光束型和双光束型。其结构可分为五个部分：光源、原子化器、光学系统、检测系统与数据处理系统。

　　1、光源

　　为测出待测元素的峰值吸收，须采用锐线光源，应满足以下一些要求：辐射强度大、辐射稳定、发射普线宽度窄。空心阴极灯是目前原子吸收光谱仪器使用的主光源，属于辉光放电气体光源。

　　空心阴极灯是一种由被测元素或含有被测元素的材料制成的圆筒形空心阴极和一个阳极（钨、钛或锆棒），密封在充有低压惰性气体的带有石英窗的玻璃壳内的电真空器件。

　　当在两极之间施加几百伏的高压，两极之间会产生放电，电子将从空心阴极内壁射向阳极，并在电子的通路上又与惰性气体原子发生碰撞并使之电离，带正电荷的惰性气体离子在电场的作用下，向阴极内壁猛烈地轰击，使阴极表面的金属原子溅射出来，而这些溅射出来的金属原子再与电子、惰性气体原子及离子发生碰撞并被激发，于是阴极内的辉光便出现了阴极物质的光谱。

　　空心阴极灯的阴极材料的纯度必须很高，内充气体也必须为高纯，以保证阴极元素的共振线附近不含内充气体或杂质元素的强谱线。

　　空心阴极灯的操作参数是灯电流，灯电流的大小可决定其所发射的谱线的强度。但是需根据具体操作情况来选择灯电流的大小。

　　通常情况下，空心阴极灯在使用前需预热10~15min。

　　2、原子化系统

　　原子吸收光谱中常用的原子化技术是：火焰原子化和电热原子化。此外还有一些特殊的原子化技术如氢化发生法、冷原子蒸气原子化等。

　　1）火焰原子化系统——火焰原子化器

　　火焰原子化器由雾化器、雾化室、燃烧器三部分组成。常见的燃烧器有全消耗型和预混合型。目前主要使用的是预混合型燃烧器。

　　2）、电热原子化系统——石墨炉原子化器

　　非火焰原子化器中适用***广的是管式石墨炉原子化器。组成部分为：石墨管、炉体、电源。样品直接放置在管壁上或放置在嵌入管内的石墨平台上，用电加热至高温实现原子化。

　　3、光学系统

　　光学系统为光谱仪的心脏，一般由外光路与单色器组成。

　　外光路可以分为单光束与双光束。单光束系统中，来自光源的光只穿过原子化器，它的优点，能量损失小，灵敏度高，但不能克服由于光源的不稳定而引起的基线漂移。

　　传统双光束系统采用斩光器将来自光源的光分为样品光束与参比光束，补偿了基线漂移，但能量损失大。

　　单色器置于原子化器之后，这样可将空心阴极灯阴极材料的杂质发出的谱线、惰性气体发出的谱线以及分析线的邻近线等与共振吸收线分开并防止光电管疲劳。

　　由于锐线光源的谱线简单，故对单色器的色散率要求不高(线色散率为10-30?/mm)。

　　4、检测系统与数据处理系统

　　检测系统包括检测器、放大器、对数转换器及显示装置等。光电倍增管是原子吸收光谱仪的主要检测器，要求在180-900nm测定波长内具有较高的灵敏度，并且暗电流小。目前通过计算机软件控制的原子吸收光谱仪具有很强的数据处理能力。