三种固相萃取柱的使用方法 固相萃取柱使用方法

**、反相萃取柱操作

从极性基体中提取非极性的样品

1、活化：以3—5毫升甲醇淋洗萃取柱;以3—5毫升去离子水(或缓冲液)淋洗萃取柱并保持萃取柱湿润

2、上样：以合适的流速使样品均匀通过萃取柱

3、清洗：以5毫升适当极性的溶剂洗脱吸附样品的萃取柱(常用的有纯水,缓冲液,水/有机溶剂混合液)

4、洗脱：将被测样品,用1—5毫升非极性溶剂分批洗脱至收集容器

第二、正相萃取柱操作

从非极性基体中提取极性的样品

1、活化：3—5毫升非极性溶剂淋洗萃取柱

2、清洗：以5毫升适当非极性的溶剂洗脱吸附样品的萃取柱

3、洗脱：将被测样品,用1—5毫升极性溶剂分批洗脱至收集容器

第三、离子交换萃取柱

提取带电荷的样品

1、活化：以3—5毫升去离子水/或低离子强度的缓冲液淋洗萃取柱

2、上样：以较低的流速,使样品均匀通过萃取柱

3、清洗：5毫升去离子水/或低离子强度的缓冲液淋洗萃取柱

4、洗脱：将被测样品,用1—5毫升高离子强度的缓冲液洗脱至收集容器

固相萃取装置是一种被广泛应用且备受欢迎的样品前处理技术,就是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基体和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离和富集目标化合物的目的。它在传统的液—液萃取基础上采用物质间相似作用的相似相溶试验方法并结合目前广泛应用的液相色谱和气相色谱固定相基本知识发展而来。

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**、参考固相萃取柱的类型及应用，选择适当的填料类型，然后选择固相萃取柱的大小和填料量。

反相、正相和吸附类型的过程：被萃取样品的质量不超过柱中填料量的5%，也就是说，如果您用100毫克/1ml的固相萃取柱，分析物质不超过5毫克。

离子交换过程：您必须考虑离子交换的容量：SAX和SCX其吸附剂容量为0。2毫

当量/克。

第二、选择好萃取柱后，按图所示的四个步骤进行萃取过程：

步骤一：预处理萃取柱。

在萃取样品之前，为了湿润固相萃取柱填料，用一满管溶剂冲洗管子。反相类型硅胶和非极性吸附剂介质，通常用水溶性有机溶剂如甲醇预处理，然后用水或缓冲溶液。甲醇湿润吸附剂表面和渗透键合烷基相，以允许水更有效地湿润硅胶表面。有时前预处理溶剂使用在甲醇之前。这些溶剂通常是与洗脱溶剂一样，是用之**固相萃取管上的杂质及其对分析物的干扰，也可能该杂质只溶于强洗脱溶剂。

正相类型固相萃取硅胶和极性吸附剂介质，通常用样品所在的有机溶剂来预处理。离子交换填料将用于非极性有机溶剂中的样品，其用3-5ml的去离子水或低浓度的离子缓冲溶液来预处理。为了使固相萃取填料从预处理到样品加入时都保持湿润，允许大约1毫升的预处理溶剂在管过滤片(frit)或萃取片表面之上。如果样品是从一个贮液管或过滤管引入固相萃取管，则多加入0。5毫升***后的预处理溶剂到1毫升的固相萃取管中，如果是2毫升到3毫升的萃取柱中，多加入4升到6毫升管中等等。这是为了保证在样品加入之前萃取柱湿润。如果在样品加入之前，萃取柱中的填料干了，重复预处理过程。在重新引入有机溶剂之前，用水冲洗柱中缓冲溶液的盐。

步骤二：加入样品。

将样品装入萃取柱，此时，固相萃取小柱中的填料会吸附样品中所感兴趣的化合物或者样品中的杂质。这样，当样品流出时，所选择的化合物（包括杂质）被留在萃取柱上。

步骤三：冲洗填料。

用一种强得能洗脱杂质而又弱得能保留感兴趣的化合物的冲洗液来冲洗杂质。

步骤四：洗脱感兴趣的化合物。

用溶剂将被吸附在萃取柱上的化合物洗脱在溶液里。

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聚合物树脂固相萃取柱

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低溶剂消耗固相萃取柱

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