液相色谱柱的常见问题与解决方法及解决方案

　　【*** 维修保养】液相色谱柱在使用过程中常见的问题有柱压升高、峰拖尾变宽、分离效果下降等。一般情况下这些都是色谱柱使用时间过长引起的正常现象，只需对色谱柱进行清洗与再生便可解决。但是如果柱压突然升高，则需要检查色谱柱是否出现问题。可能的原因有以下几点：　　1.柱头的过滤筛板被污染　　解决方法：卸下柱头螺丝，将过滤筛板取下，放置在30%左右的稀硝酸中，然后用超声波清洗10分钟。再将过滤筛板放入超纯水，超声清洗约10分钟，之后将过滤筛板重新装回色谱柱。　　2.填料被污染　　解决方法：　　①卸下柱头螺丝，将前端被污染的填料用专用小匙挖出，然后重新填入相同的填料。　　②选择合适的流动相，按色谱柱使用的方向冲洗，冲洗量须大于色谱柱体积的20倍，将污染物溶解并冲出色谱柱，然后，按照色谱柱标明的箭头方向使用。　　3.缓冲盐溶液遇到纯有机相析出盐结晶，堵塞色谱柱　　解决方法：先用冲洗色谱柱，将盐晶体溶解并冲出色谱柱，然后换高浓度甲醇水溶液或其他有机溶剂作为流动相。　　4.流动相的PH值偏差过大，造成固定相溶解或结构被破坏　　解决方法：此时很难将色谱柱修复通常需要直接更换色谱柱。 **液相色谱仪常见问题及解决方法

　　**液相色谱仪作为一种高精密仪器，如果在使用过程中不按照正确操作的话，就容易导致一些问题。其中***常见的有柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。

　　一、液相色谱仪压力过低压力过低的现象一般是由于系统泄漏，处理方法：寻找各个接口处，特别是色谱柱两端的接口，把泄漏的地方旋紧即可。当然还有一个原因就是泵里进了空气，但此时表现的往往是压力不稳，忽高忽低，更严重一点会导致泵无法吸上液体。处理方法：打开Purge阀，用3~5ml/min的流速冲洗，如果不行，则要用专用针筒在排空阀处借住外力将气泡吸出。　　二、液相色谱仪柱压问题柱压问题是使用**液相色谱过程中需要密切注意的地方，柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在50PSI之间（在使用梯度洗脱时，柱压平稳缓慢的变化是允许的）。压力过高、过低都属于柱压问题。　　三、液相色谱仪压力过高这是**液相在使用中***常见的问题，指的是压力突然升高，一般都是由于流路中有堵塞的原因。此时，我们应该分段进行检查。　　（1）.首先断开真空泵的入口处，此时PEEK管里充满液体，使PEEK管低于溶剂瓶，看液体是否自由滴下，如果液体不滴或缓慢滴下，则是溶剂过滤头堵塞。处理方法：用30%的硝酸浸泡半个小时，在用超纯水冲洗干净。如果液体自由滴下，溶剂过滤头正常，在检查；　　（2）.打开Purge阀，使流动相不经过柱子，如果压力没有明显下降，则是过滤白头堵塞。处理方法：将过滤白头取出，用10%的异丙醇超声半个小时。如果压力降至100PSI以下，过滤白头正常，在检查；　　（3）.把色谱柱出口端取下，如果压力不下降，则是柱子堵塞。处理方法：如果是缓冲盐堵塞，则用95%的水冲至压力正常。如果是一些强保留的物质导致堵塞，则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降，则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上，用流动相冲洗柱子。这时，如果柱压仍不下降，只有换柱子入口筛板，但一旦操作不甚，很容易造成柱效下降，所以尽量少用。