液相色谱仪检测器的保养维护及使用方法

　　液相色谱仪是一种利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异，对混合物进行先分离，而后分析鉴定的仪器。现代液相色谱仪一般由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。可以说每个部分的品质好坏都可能直接影响仪器的检测结果。　　一般来说，液相色谱仪使用后，应该对检测器进行清洗。常规清洗不必拆下流通池，可直接在流通池入口处(即检测器输入端)，接上一个专用的注射器接头，依次用去离子水、酒精和3MHNO3冲洗流通池，后用去离子水反复冲洗数次。检测器出口用玻璃瓶盛接流出的废液。　　但如果检测器已长期使用或受到高浓度样品的污染，经上述方法还不能除去污垢，就得取下流通池，按以下步骤拆开进行清洗：　　1.卸下紫外检测器侧面遮盖流通池的盖板，松开固定流通池支架的螺钉，小心地取出流通池支架。　　2.拆下连接流通池输入、输出端的不锈钢导管(或PEEK导管)，卸下流通池体。仔细拧下石英窗和透镜的护圈。小心取下垫圈、石英窗、透镜、护圈，放在一个盛有乙醇的烧杯内，用超声波清洗机处理5min~10min。　　3.用蒸馏水、乙醇冲洗流通池，并用超声波清洗，后用去离子水冲洗数次，除去池内杂物。　　4.烘干各部件(注意：避免用手直接接触透镜及石英窗)。　　5.重新装配流通池体。　　6.按原样装在流通池支架上，并接好导管，并进行试漏。(方法：池体输入端与恒流泵连接，开启恒流泵(流动相用蒸馏水)，视各密封点及石英窗口是否有漏液溢出。　　7.装入紫外检测器机箱内，盖上盖板，并用原螺钉、螺帽固定。　　注：上述液相色谱仪检测器的保养拆洗应有经培训过的专业维修人员进行。 **液相色谱仪操作步骤

　　**液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。与经典的液相色谱相比，具有**液相所用的固定相粒度小（5um-10um）、传质快、柱效高的优势。近年来，在保健食品功效成分、营养强化剂、维生素类、蛋白质的分离测定等应用广泛。世界上约有80％的有机化合物可以用HPLC来分析测定。

　　**液相色谱的分离过程HPLC，借溶质在两相间分配系数、亲和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差别使不同溶质得以分离。

　　**液相色谱仪操作步骤：

　　1)过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜。

　　2)对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。

　　3)打开HPLC工作站(包括计算机软件和色谱仪)，连接好流动相管道，连接检测系统。

　　4)进入HPLC控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。

　　5)一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵，直接在泵的出水口，用针头抽取。冲洗进样阀，需要在manual菜单下，先点击purge，再点击start，冲洗时速度不要超过10ml/min。

　　6)调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大，压力越大，一般不要超过2000。点击injure，选用合适的流速，点击on，走基线，观察基线的情况。

　　7)设计走样方法。点击file，选取selectusersandmethods，可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法，点击newmethod。选取需要的配件，包括进样阀，泵，检测器等，根据需要而不同。选完后，点击protocol。一个完整的走样方法需要包括：a.进样前的稳流，一般2-5分钟；b.基线归零；c.进样阀的loading-inject转换；d.走样时间，随不同的样品而不同。

　　8)进样和进样后操作。选定走样方法，点击start。进样，所有的样品均需过滤。方法走完后，点击postrun，可记录数据和做标记等。**样品走完后，再用上面的方法走一段基线，洗掉剩余物。

　　9)关机时，先关计算机，再关液相色谱。