分光光度计的使用方法和注意事项 光度计使用方法

　　【*** 使用手册】分光光度计，又称光谱仪(spectrometer)，是将成分复杂的光，分解为光谱线的科学仪器。　　使用方法：　　1、预热仪器。为使测定稳定，将电源开关打开，使仪器预热20min，为了防止光电管疲劳，不要连续光照。预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开，使光路切断。　　2、选定波长。根据实验要求，转动波长调节器，使指针指示所需要的单色光波长。　　3、固定灵敏度档。根据有色溶液对光的吸收情况，为使吸光度读数为0.2-0.7，选择合适的灵敏度。为此，旋动灵敏度档，使其固定于某一档，在实验过程中不再变动。一般测量固定在“1”档。　　4、调节“0”点。轻轻旋动调“0”电位器，使读数表头指针恰好位于透光度为“0”处(此时，比色皿暗箱盖是打开的，光路被切断，光电管不受光照)。　　5、调节T=百分之一百。将盛蒸馏水(或空白溶液或纯溶剂)的比色皿放入比色皿座架中的一格内，有色溶液放在其它格内，把比色皿暗箱盖子轻轻盖上，转动光量调节器，使透光度T=百分之一百，即表头指针恰好指在T=百分之一百处。　　6、测定。轻轻拉动比色皿座架拉杆，使有色溶液进入光路，此时表头指针所示为该有色溶液的吸光度A。读数后，打开比色皿暗箱盖。　　7、关机。实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比色皿座架及暗箱用软纸擦净。　　注意事项：　　1、为了防止光电管疲劳。不测定时必须将比色皿暗箱盖打开，使光路切断，以延长光电管使用寿命。　　2、比色皿的使用方法：　　①、拿比色皿时，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污。　　②、清洗比色皿时，一般先用水冲洗，再用蒸馏水洗净。如比色皿被有机物沾污，可用盐酸-乙醇混合洗涤液(1∶2)浸泡片刻，再用水冲洗。不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗比色皿，以免损坏。也不能用毛刷清洗比色皿，以免损伤它的透光面。　　每次做完实验时，应立即洗净比色皿。　　③、比色皿外壁的水用擦镜纸或细软的吸水纸吸干，以保护透光面。　　④、测定有色溶液吸光度时，**要用有色溶液洗比色皿内壁几次，以免改变有色溶液的浓度。另外，在测定一系列溶液的吸光度时，通常都按由稀到浓的顺序测定，以减小测量误差。　　⑤、在实际分析工作中，通常根据溶液浓度的不同，选用液槽厚度不同的比色皿，使溶液的吸光度控制在0.2～0.7。 紫外可见分光光度计的构造试验方法

紫外及可见光分光光度计的可测波长范围为200一1000 nm，也有波长范围为200- 400 nm的紫外分光光度计，但前者较为普遍。紫外及可见光分光光度计的构造试验方法与可见光分光光度计(如721型分光光度计)相似。由于玻璃吸收紫外光，因此单色器要用石英棱镜或光栅。 (一)光(light source) 有钨丝灯及氢灯(或氛灯)两种。可见光区(360一1000 nm)使用钨丝灯;紫外光区 (200一360 nm)则用氢灯或氛灯。 (二)吸收池(absorption cell) 由于玻璃吸收紫外光.吸收池要用石英材质。 (三)检浏器(detector) 检侧器使用两只光电管，一为氧化艳光电管，用于625一1000 nm波长范围;另一只是锑艳光电管，用于200一625 nm波长范围。光电倍增管亦为常用的检测器，其灵敏度比一般的光电管高2个数量级。 紫外及可见光分光光度计分单光束和双光束型。单光束型仪器使用前一般需要预热以使仪器稳定，缺点是难以**与补偿由于光源与电子测量系统不稳定等所引致的误差。双光束型仪器能够**与补偿由于光源、电子测量系统不稳定等所引致的误差，所以其测盘的**度就提高了。 其工作试验方法可描述为:由光源(钨丝灯氘灯，根据波长而变换使用)发出的光经人口狭缝及反射镜反射至石英棱镜或光栅，色散后经过出口狭缝而得到所需波长的单色光束。然后由反射镜反射至由马达转动的调制板及扇形镜上。当调制板以**转速旋转时，时而使光束通过，时而挡住光束，因而调制成**频率的交变光束。之后扇形镜在旋转时，将此交变光束交替地投射到参比溶液(空白溶液)及试样溶液上，后面的光电倍增管接受通过参比溶液及为试样溶液所减弱的交变光通量，并使之转变为测量信号。此信号经放大并用解调器分离及整流，然后以电位器自动平衡此两直流信号的比率，并依照记录器记录得到吸收曲线。