液相色谱仪色谱柱压升高原因 液相色谱使用方法

　　色谱是一种分离分析手段，分离是核心，因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对于液相色谱仪来说，保持色谱柱的柱效、容量及渗透性，对于检测结果的准确性有着比较重要的意义。而色谱柱的柱效受到内外多种因素影响，色谱柱压升高就是其中之一。柱压升高的原因可能是因为柱床内存在杂质，导致流动项阻力增加。　　这次就来讲一下，色谱柱压升高的原因。　　1.样品的沉淀　　当溶解样品的溶剂与流动相不一致时，样品进入色谱柱，有时可能因溶解度降低而沉淀出来，使色柱中产生样品沉淀，造成流体阻力增加，引起柱压升高。　　2. 晶体的析出　　使用含有缓冲液的流动相时，缓冲液中的无机盐可能会残留在部件内。它们会因在新流动相中的溶解度降低而析出，造成流体阻力加大、压力升高。　　3. 流动相的前处理　　流动相过滤不**或为进行过滤，将杂质等固体物滞留到滤板上，引起杂质堵塞色谱柱滤片，引起柱压升高。　　4. 溶质吸附　　当溶质在柱子上有较强的吸附，且所用的流动相难以将它们洗脱时，累积的未洗脱溶质也会造成阻力增大和压力升高。　　5. 流动相更换过度较快　　当改变流动相体系时，不**的更换使不同性质、互不混溶的流动相存在于同一个体系之中，也会造成压力升高。　　6. **或霉菌孳生　　未能做到磷酸盐缓冲液现配现用，导致霉菌在流动相中、管路中或柱子进口处繁殖、生长堵塞滤板，导致压力升高。　　7. 压力脉冲　　运行过程中，有时会产生系统内压力的突然升降。如此所形成的压力脉冲会造成多孔填料的崩坏和柱床结构的微小变化，填料微屑的长期积累也可能会使柱床阻力增大，造成压力升高。　　液相色谱仪是一种精密的色谱仪器，它在协助使用者进行分析研究的同时，也需要使用者的细心呵护。对于每一种仪器，使用者都应该警惕使用时的不当操作，这样不但可以获得更加的检测数据，还可以有效保护仪器，延长仪器寿命。 液相色谱仪与气相色谱仪的3点区别

　　1、分析对象的区别　　GC：适于能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品；但对高沸点、挥发性差、热稳定性差、离子型及高聚物的样品，尤其对大多数生化样品不可检测占有机物的20%　　HPLC：适于溶解后能制成溶液的样品（包括有机介质溶液），不受样品挥发性和热稳定性的限制，对分子量大、难气化、热稳定性差的生化样品及高分子和离子型样品均可检测用途广泛，占有机物的80%　　2、流动相差别的区别　　GC：流动相为惰性，气体组分与流动相无亲合作用力，只与固定相有相互作用。　　HPLC：流动相为液体，流动相与组分间有亲合作用力，能提高柱的选择性、改善分离度，对分离起正向作用。且流动相种类较多，选择余地广，改变流动相极性和pH值也对分离起到调控作用，当选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相也可以增大分离选择性。　　3、操作条件区别　　GC：加温操作　　HPLC：室温；高压（液体粘度大，峰展宽小）