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光学显微镜和电子显微镜有何区别 光学显微镜使用方法

时间:2023-01-10 09:30:02 作者:河北航信仪器 点击:

  【***** 使用手册】电子显微镜是以电子束为照明源,通过电子流对样品的透射或反射及电磁透镜的多级放大后在荧光屏上成像的大型仪器。光学显微镜利用可见光照明,将微小物体形成放大影像的光学仪器。概括起来,电镜与光镜主要有以下几个方面的区别:  (1)照明源不同  电镜所用的照明源是电子枪发出的电子流,而光镜的照明源是可见光(日光或灯光),由于电子流的波长远短于光波波长,故电镜的放大及分辨 率显著地高于光镜。  (2)透镜不同  电镜中起放大作用的物镜是电磁透镜(能在**部位产生磁场的环形电磁线圈),而光镜的物镜则是玻璃磨制而成的光学透镜。电镜中的电磁透镜共有三组,分别与光镜中聚光镜、物镜和目镜的功能相当。  (3)成像试验方法不同  在电镜中,作用于被检样品的电子束经电磁透镜放大后打到荧光屏上成 像或作用于感光胶片成像。其电子浓淡的差别产生的机理是,电子束作用于被检样品时,入射电子与物质的原子发生碰撞产生散射,由于样品不同部位对电子有不同散射度,故样品电子像以浓淡呈现。而光镜中样品的物像以亮度差呈现,它是由被检样品的不同结构吸收光线多少的不同所造成的。  (4)分辨率  光学显微镜因为光的干涉与衍射作用,分辨率只能局限于02-05um之间。电子显微镜因为采用电子束作为光源,其分辨率可达到1-3nm之间,因此光学显微镜的组织观察属于微米级分析,电子显微镜的组织观测属于纳米级分析。  (5)景深  一般光学显微镜的景深在2-3um之间,因此对样品的表面光滑程度具有**的要求,所以制样过程相对比较复杂。扫描电镜的精神则可高达几个毫米,因此对样品表面的光滑程度几何没有**要求,样品制备比较简单,有些样品几何无需制样。体式显微镜虽然也具有比较大的景深,但其分辨率却非常的低。  (6)所用标本制备方式不同  电镜观察所用组织细胞标本的制备程序较复杂,技术难度和费用都较高,在取材、固定、脱水和包埋等环节上需要特殊的试剂和操作,后还需将包埋好的组织块放人超薄切片机切成50~100nm厚的超薄标本片。而光镜观察的标本则一般置于载玻片上,如普通组织切片标本、细胞涂片标本、组织压片标本和细胞滴片标本。  (7)应用领域  光学显微镜主要用于光滑表面的微米级组织观察与测量,因为采用可见光作为光源因此不仅能观察样品表层组织而且在表层以下的**范围内的组织同样也可被观察到,并且光学显微镜对于色彩的识别非常敏感和准确。电子显微镜主要用于纳米级的样品表面形貌观测,因为扫描电镜是依靠物理信号的强度来区分组织信息的,因此扫描电镜的图像都是黑白的,对于彩色图像的识别扫描电镜显得无能为力。扫描电镜不仅可以观察样品表面的组织形貌,通过使用EDS、WDS、EBSD等不同的附件设备,扫描电镜还可进一步扩展使用功能。通过使用EDS、WDS辅助设备,扫描电镜可以对微区化学成分进行分析,这一点在失效分析研究领域由为重要。使用EBSD,扫描电镜可以对材料的晶格取向进行研究。 光学显微镜结构的主要部分

  目镜:将物镜放大的实像进一步放大成一个起立的虚像,其作用相当于一个放大镜,但是目镜并不增加光学显微镜的分辨力。一般光学显微镜备有几个放大倍数不同的目镜,放大倍数会刻在目镜边缘,如5x、10x和15x等,临床***常用放大10x的目镜。  物镜:多数复式显微镜有3个或4个物镜,每个物镜的放大率都不同,多数物镜的放大倍数包括:4x(扫描)、10x(低倍)、40x(高倍)和100x(油镜)。物体的放大倍数为目镜的放大倍数乘以物镜的放大倍数,如物体放置在4x的物镜下,用10x目镜观察,镜下的放大倍数为40x[(4x)X(10x)]。  聚光器:作用是会聚由反射镜反射来的光线,增加标本的照明,升降聚光器,可调节照明强度和改变对比度。  光圈环:由十余片金属薄片组成,**部分形成圆孔,通过旋转光圈环,可调节圆孔的大小,由此调节光线的强弱。  粗准焦螺旋和细准焦螺旋:调节物镜与标本之间的距离,使物镜的焦点对准标本,得到更清晰的图像,粗准焦螺旋旋转一周可使镜筒升降20mm,细准焦螺旋每旋转一周可使镜筒升降0.1mm或更小。

光学显微镜和电子显微镜有何区别 光学显微镜使用方法(图1)


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