紫外可见分光光度计有哪些类型 光度计使用方法

　　【*** 使用手册】紫外可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法试验方法，利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种分析仪器，主要由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。　　分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。　　紫外可见分光光度计的类型很多，基本可以归纳为三种类型：单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计。　　单光束分光光度计　　其光路经单色器分光后的一束平行光，轮流通过参比溶液和样品溶掖，以进行吸光度的测定。这种类型的分光光度计结构简单，操作方便，维修容易，适用于常规分析。国产722型，751型、724型、英国SP500型以及 BackmanDU-8型等均属于此类光度计。　　双光束分光光度计　　其光路经单色器分光后经反射镜(M1)分解为弧度相等的两束光，一束通过参比池，另一束通过样品池。光度计能自动比较两束光的强度，此比值即为试样的透射比，经对数变换将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来。双光束分光光度计一般都能自动记录吸收光谱曲线。由于两束光同时分别通过参比池和样品他，还能自动**光源强度变化所引起的误差。这类仪器有国产710型、730型和740型，日立220系列，岛津-210，英国UNICAMSP-700等等。　　双波长分光光度计　　其基本光路由同一光源发出的光被分成两束，分别经过两个单色器，得到两束不同波长的单色光;再利用切光器使两束光以**的频率交替照射同一吸收池，然后经过光电倍增管和电子控制系统，zui后由显示器显示出两个波长处的吸光度差值ΔA(ΔA=A1-A2)。　　双波长分光光度计的优点在于，对于多组分混合物、混浊试样(如生物组织液)的分析，以及存在背景于扰或共存组分吸收干扰的情况下，利用双波长分光光度法，往往能提高方法的灵敏度和选择性。利用双波长分光光度计，能获得导数光谱。通过光学系统转换，使双波长分光光度计能很方便地转化为单波长工作方式。如果能在两波长处分别记录吸光度随时间变化的曲线，还能进行化学反应动力学研究。 紫外可见分光光度计使用说明

紫外可见分光光度计来自于美国，产品包含光源，单色器，吸收池，检测器和显 示器等，它是一款对物质进行定性，定量以及结构分析的仪器。这款仪器和人们常 用的可见光光度计有有很大的区别，除了波长范围，使用光源都不一样等，价格也 是后者要要贵一些；平时的使用和注意事项不一样的，今天就先来学习一下紫外可见分光光度计使用方法： 1.试验中所用的量瓶、移液管均应经检定校正、洗净后使用。 2.使用的石英吸收池必须洁净。用于盛装样品、参比及空内溶液的吸收池，当装 入同一溶剂时，在规定波长测定吸收池的透光率，如透光率相差在0.3%以下者可配 对使用，否则必须加以校正。 3.取吸收池时，手指拿毛玻璃面的两侧。装盛样品溶液以池休积的4/5为度，使用 挥发性溶液吋应加盖，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无残留溶剂。 为防止溶剂挥发后溶质残留在池子的透光面，可先用蘸有空白溶剂的擦镜纸擦拭， 然后再用干擦镜纸拭净。吸收池放入样品室时应注意每次放入方向相同。使用后用 洗液及水冲洗干净，晾干防尘保存，吸收池发现污染不易洗净时可用硫酸发烟硝酸(3 ：1V/V)混合液稍加浸泡后，洗净备用。如用重铬酸钾清洁液清洗时，吸收池不贫在 清洁液中长时间浸泡，否则清洁液中的重铬酸钾结晶会损坏吸收池的光学表面，并 应充分甩水冲洗，以防重铬酸钾吸附于吸收池表面。 4.测定前应先检查所用的溶剂在测定供试品所用的波长附近是否符合要求，可用 lcm石英吸收池盛溶剂以空气为空白（即参比光路中不放置**物质)测定其吸收度 ，应符合规定。 5.称量应按药典规定要求。配制测定溶液时稀释转移次数应尽可能少，转移稀释 时所取容积一般应不少于5cm。含量测定供试品应称取2份，如为对照品比较法，对 照品一般也应称取2份。吸收系数检查也应称取供试品2份，平行操作，每份结果对 平均值的偏差应在±0.5%以内。作鉴别或检查可取样品1份。 6.供试品测定溶液的浓度，除各该品种项下已有注明者外，供试品溶液的吸收度 以在0.3~0.7之间为宜，吸收度读数在此范围误差较小，并应结合所用仪器吸收度线 性范围，配制合适的读数浓度。 7.选用仪器的狭缝谱带宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度值 会偏低，狭缝宽度的选择应以减小狭缝宽度吋供试品的吸收度不挥增加为准，对于 紫外测定的部分品种，可以使用2nm缝宽，但对某些品种如青霉素钾及钠的吸收度 检查则需用lnm缝宽或更窄，否则其264nm的吸收度会偏低。 8.测定时除另有规定者外，应在规定的吸收峰±2nm处，再测几点的吸收度，以核 对供试品的吸收峰位置是否正确，并以吸收度**的波长作为测定波长，除另有规 定外吸收度**波长应在该品种项下规定的波长±lnm以内，否则应考虑试样的同一 性、纯度以及仪器波长的准确度 9.除另有规定外，比色法所用的空内系指用同休积的溶剂代替对照品或供试品溶 液，然后依次加入等量的相应试剂，并用同样方法处理。 10.当吸收度和浓度关系不呈线性关系时，应取数份梯度量的对照浓度，用溶剂补 充至同一休积，显色后测定各份溶液的吸收度，然后以吸收度与相应的浓度绘制标 准曲线，再根据供试品的吸收度在标准曲线上求出其含量。