夹芯式电泳槽的使用方法与注意事项电泳槽使用方法

时间：2023-01-07 09:32:02 作者：河北航信仪器点击：

　　【***** 使用手册】所谓电泳，是指带电粒子在电场中的运动，不同物质由于所带电荷及分子量的不同，因此在电场中运动速度不同，根据这一特征，应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定量分析，或将**混合物进行组份分析或单个组份提取制备，这在临床检验或实验研究中具有极其重要的意义。电泳仪正是基于上述试验方法设计制造的。下面简单介绍其使用方法及注意事项。

　　　　一、如何使用电泳槽　　夹芯式垂直电泳槽使用方法：　　1、组成部件　　(1)装有铂金丝的贮液槽一对，配有冷却装置及电泳缓冲液流出口。　　(2)凹型橡胶框，配有玻璃板，可分别制作厚度为lmm、1.5mm的凝胶板，操作时根据需要选择适当厚度的玻璃板及梳子配套使用。　　(3)样品孔模具(梳子)用于电泳加样。　　(4)固定贮液槽的螺丝杆及螺母4对，28D、30型为5对。　　(5)橡胶管五根。两根长的用于连接冷却水的出入口；中等长度的两根用于连接电极缓；中液的流出口；zui短的一根用于连接贮液槽间的冷却水。　　(6)导线1付。　　2、使用方法　　(1)清洗部件　　上述部件组装前要**清洗干净。尤其是玻璃板及凹形带槽橡胶框，必须用泡沫海绵沾少许肥皂粉或洗涤剂**清洗干净。清洗后的玻璃板应放在玻璃板支架上晾干水后方能使用。　　(2)组装电泳槽　　A、将四只固定螺杆插进一只贮液框(半上槽)的相应孔洞中，然后将贮液框仰放在桌上；　　左手拿凹型槽橡胶模框，右手的拇指与中指握住玻璃板的两侧边缘插到橡胶模框内 (注意手指不能接触灌胶面的玻璃板)；　　将带有玻璃的橡胶模框子放在仰放的贮液槽框架上，其下缘必须对齐贮液槽框下缘；　　双手拿另一只贮液槽框与仰放在桌上的贮液槽框相合，并使橡胶框上的凸出线位于贮液槽有机玻璃框**；　　装上四只螺母，拧紧螺丝。注意拧紧螺丝时用力应均匀，用双手按斜角位置双双逐渐拧紧；　　将电泳槽垂直竖起，放在桌上，带短玻璃板的贮液槽称上槽(阴**)，带长玻璃板的贮液槽称为下槽(阳**)，在长玻璃板与橡胶框间有一缝隙。此缝隙可用已熔化的10%琼脂沿长玻璃板下端灌入，为防止留存气泡，可稍抬起一端即可赶去气泡。待琼脂**凝固后才能灌胶。　　B、也可将槽垂直竖起，将带有玻璃的橡胶模框直接放入槽中，对称拧紧螺丝后，用琼脂封底边。　　3、灌胶　　(1)先灌分离胶，待凝固后再灌浓缩胶。灌胶前接通冷却水，夹紧连接上下贮液槽的两根橡胶管。　　(2)用细头滴管吸取胶液，沿长、短玻璃板中间缝隙从一端加入胶液。为防止产生气泡，可稍拾起另一端(气泡往高处走)，不断加入胶液。若单层胶(分离胶)则加胶量约距离短玻璃板上端0.3厘米处，轻轻加少许水，双手轻轻将梳子插入，待胶凝后就可形成凹形加样孔。　　(3)为防止漏胶，在上、下贮液槽中立即加入蒸馏水，但蒸馏水不能超过短玻璃板上缘。　　(4)胶凝固后即可看到样品槽梳子与凝胶板间有一层折　　射率不同的亮区。　　4、加样　　(1)松开连接上、下贮液槽两根橡皮管上的夹子，放掉槽内的蒸馏水，待水流完后，再夹紧夹子。　　(2)双手轻轻取出样品梳子，即可看到界线清楚的加样孔，将孔中水分吸去(注意千万不要碰坏孔沿的字面)。　　(3)在上、下贮液槽中加入缓；中液，液体高度应超过上贮液槽短玻璃板上缘。　　(40用微量注射器吸取**量的样品加到长、短玻璃板间的凹型凝胶样品孔内(注意加样动作要轻，针头不能碰坏胶面)。　　5、电泳　　一贮液槽导线与电泳仪的负极相连，下贮液槽导线与电泳仪的正极相连。检查线路无误，方可按照所要求的电压电流进行电泳。　　二、注意事项　　1、电泳仪通电进入工作状态后，禁止人体接触电极、电泳物及其它可能带电部分，也不能到电泳槽内取放东西，如需要应先断电，以免触电。同时要求仪器必须有良好接地端，以防漏电。　　2、仪器通电后，不要临时增加或拨除输出导线插头，以防短路现象发生，虽然仪器内部附设有保险丝，但短路现象仍有可能导致仪器损坏。　　3、由于不同介质支持物的电阻值不同，电泳时所通过的电流量也不同，其泳动速度及泳至终点所需时间也不同，故不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。　　4、在总电流不超过仪器额定电流时(zui大电流范围)，可以多槽关联使用，但要注意不能超载，否则容易影响仪器寿命。　　5、某些特殊情况下需检查仪器电泳输入情况时，允许在稳压状态下空载开机，但在稳流状态下必须先接好负载再开机，否则电压表指针将大幅度跳动，容易造成不必要的人为机器损坏。　　6、使用过程中发现异常现象，如较大噪音、放电或异常气味，须立即切断电源，进行检修，以免发生意外事故。电泳槽的常见问题解决介绍

电泳槽时凝胶时间不对，那么通常胶在60min，1H内凝；

如果凝的太慢，可能是TEMEN，APS剂量不够或者失效。

APS应该现配现用，TEMED不稳定，容易被氧化成黄色。

如果凝的太快，可能是APS和TEMED用量过多，此时胶太硬易裂，电泳时易烧胶。

纹理和托尾现：

夹芯式电泳槽的使用方法与注意事项电泳槽使用方法(图1)