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液相色谱流动相的贮存方法 液相色谱使用方法

时间:2023-01-01 09:30:02 作者:河北航信仪器 点击:

液相色谱流动相的贮存方法 液相色谱使用方法(图1)

【导读】液相色谱流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因为许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料中的增塑剂,导致溶剂被污染。被污染

液相色谱流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因为许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料中的增塑剂,导致溶剂被污染。被污染的溶剂如用于液相色谱系统,可能造成柱效降低。贮存容器**要盖严,防止溶剂挥发引起组成的变化,同时防止空气中的氧和二氧化碳溶入流动相中。磷酸盐、乙酸盐缓冲液极易长霉,应尽量新鲜配制使用。如需贮存,可至于冰箱内冷藏,并且一般不要超过3天。卤代溶剂中可能含有微量的酸性杂质,能与液相色谱仪系统中的不锈钢反应。卤代溶剂与水的混合物比较容易分解,不能存放太久。卤代溶剂混合后,可能会反应生成一些对不锈钢有较大腐蚀性的化合物。因此,尽量不采用卤代溶剂的混合流动相,或者使用之前新鲜配制。此外,卤代溶剂与一些反应性有机溶剂(如乙腈)混合静置时,还可能产生结晶。贮液器是装预混合流动相或流动相组分的容器,构造相对简单,但用于不合适的贮液器也可能带来问题。贮液器被污染了可能阻塞烧结不锈钢过滤片,影响液相色谱仪泵性能,在色谱图种出现多余的峰或者产生噪声。贮液器的容积一般为1L,有的贮液器仅能用于冲氦气,而不能用于真空脱气,因为有破裂的危险。用于真空脱气的贮液器要加厚或者加外套。自备的贮液器要松松地盖上盖子,以挡灰尘。盖得太紧会形成部分真空,使泵停止运转。

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液相色谱填料的粒度选择

  现代**液相色谱中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。但是色谱填料的选择范围很宽,要做合适的选择,首先必须对此有**的认识和了解。

  液相色谱填料可以是陶瓷性质的无机物基质,也可以是有机聚合物基质。液相色谱填料中的有机物基质主要是硅胶和氧化铝。无机物基质刚性大,在溶剂中不容易膨胀。

  液相色谱填料中有机聚合物基质主要有交联苯乙烯-二乙烯苯、聚甲基丙烯酸酯。有机聚合物基质刚性小、易压缩,溶剂或溶质容易渗入有机基质中,导致填料颗粒膨胀,结果减少传质,***终使柱效降低。

  液相色谱填料的粒度选择

  液相色谱填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。粒度越小,填充柱的柱效越高;然而粒度越小,柱压越大,柱压的增加限制了粒度小于3μm的填料应用。在相同选择性条件下,提高柱效可提高分离度,但不是**的因素。如果固定相选择是正确,但是分离度不够,那么选用更小粒度的填料是很有用的。3μm填料填充柱的柱效比相同条件下的5μm填料的柱效提高近30%;然而,3μm的色谱柱的背压却是5μm的2倍。与此同时,柱效提高意味着在相同条件下可以选用更短的色谱柱,以缩短分析时间。另外,可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度,比如用乙腈代替甲醇,以降低色谱柱的压力。


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